微生物学实验室中的主要活动是什么?
微生物实验室是专门从事细菌、真菌、酵母菌等微生物的培养、检验和鉴定的实验室。微生物实验室在有效预防和控制感染方面起着至关重要的作用。
微生物学实验室的作用:
微生物实验室造成微生物实验室表演的微生物的分离和表征起两个重要功能。
- 临床 - 定期管理感染
- 流行病学-深入了解患者体内的感染微生物有助于调查其来源和传播方式。
微生物学实验室由一个专业人士监督,具有适当的教育资格和培训。
良好的微生物实践(GMP)
GMP包括无菌技术和其他良好的微生物技术/实践至关重要,以防止在处理微生物时污染实验室。GMP采用微生物实验室技术或微生物学实验室程序,以使研究材料(微生物)保持安全的地方,而不会与其他生物接触,并且还在试验时保持人民的安全。GMP的最终目标是提取研究结果而没有任何掺假或污染。
微生物实验室技术
实验室制备和分析中的无菌技术
无菌技术是在无菌条件下进行的一种程序,以防止有害的有机体或细菌污染物引入环境。这是一项重要的微生物实验室技术,可以避免任何对实验室人员、培养物和设备的污染。
1.灭菌
在这个净化过程中,所有形式的微生物及其孢子(例如:细菌、病毒、朊病毒)都被杀死。这通常是通过物理方法,如加热、辐射、过滤或化学方法来实现的。
2.消毒
这也是一种去污过程,用于消除或抑制来自无生气物体或表面的细菌或其他病原体(微生物)的生长。
使用醇,氯等消毒剂用于使物质和表面无感染。
3.消毒
消毒的目的是杀死和根除生长在物体表面上的细菌、致病的和非致病的微生物。用于卫生处理的产品和化学品有很多,即:
基于氯的清洁剂
酒精清洁剂
甲醛
过氧化氢
2.培养技术
通过微生物学家使用五个基本的微生物学实验室程序(五个“I”),用于检查和表征微生物,即接种,孵育,分离,检查(观察)和鉴定。
为了培养微生物,将一小块样品放入培养基中,通常用铂丝探针在其表面划线。在培养基上或培养基中观察到的生长就是培养基。
文化媒介类型
每种其他微生物的营养要求都有所不同。有不同类型的培养基用于确保有机体的适当生长进行调查。介质构成不同营养素含量和一致性,因此如下归类:
A.媒体的身体状况
B.介质的化学组成
C.媒体的功能类型
基本培养基-这些可用于培养不需要培养基浓缩的细菌(如葡萄球菌和肠杆菌科)。例如:营养肉汤,营养琼脂。
富含培养基 - 它们由复杂的有机物质组成,例如血液,血清等是对特异性生长所需的血液,血清等。示例:血琼脂
选择性培养基-它们有利于选定细菌的生长,同时抑制不良细菌的生长。例如:MacConkey琼脂,Lowenstein-Jensen培养基。
差异(指示器)介质 - 这些媒体对几种不同的生物体的生长有责任,这些生物显然显示出可见的差异。染料是最常用的差分药物之一。示例:Macconkey Agar包含中性红色,是一种染料,当中性时和酸性,它是红色或粉红色的。
运输媒体 - 这些在收集后立即不能培养样品的情况下使用。示例:斯图尔特介质,Cary-Blair介质。
储存介质-当细菌要储存很长一段时间时,它们就变得必不可少了。例如:鸡蛋盐水培养基,粉笔煮熟肉汤。
2.接种和孵化
将一种特定的微生物引入培养基以培养菌落的技术称为接种。最常用的传播方法是用热消毒的试管或带消毒尖端的微管。
浇注板法,涂抹板法和条纹板方法全部包括在技术中。
一旦接种就完成,琼脂或含有接种物的肉汤就在培养箱中在一定温度下保持在所需的时间持续时间。这支持细菌的最佳生长。
3.枚举细菌
1.连续稀释:连续稀释(或料理稀释)是用于将细菌浓度降低到所需浓度的方法,以进行特定的测试方法。这简化了实验,或者在琼脂电镀的情况下使浓度更容易计数。
2.板数:板数法的结果反映了能够在给定的物理和化学条件下出现的微生物菌落的数量,例如pH,温度,可用营养素,生长抑制剂的存在等。
3.最可能的数量:MPN技术是用于估计土壤,水,食品或农产品样品中活微生物浓度的方法。这是通过在十倍的稀释液中复制液体肉汤生长来进行的。
4.使用分光光度计:在微生物学实验室中,在细菌生长研究期间常规地暗示分光光度计,以估计某些时间在培养物中的生长。
4.鉴定病原体
1.形态学:确定微生物形态特征的基本目的是帮助确定微生物可能是什么。
染色:实施以通过其细胞性质鉴定微生物。
2.染色:实施以通过其细胞性能鉴定微生物。
3.使用显微镜:显微镜是微生物学实验室中的必需品,以看到通过肉眼无法看到的大多数微生物。一些微生物如病毒需要看到电子显微镜并且不是简单的显微镜。
4.生物化学测试:生物化学测试背后的目的是根据其酶活性分辨各类细菌。
一些常见的生物化学测试是吲哚试验,过氧化氢酶试验,氧化酶测试,DNase测试等。
5.运动能力:通过这种微生物实验室技术,可以了解微生物的运动能力,从而区分其他微生物。
6.微生物血清学:血清学测试或血清学测试或抗体试验,是用于测定病毒和细菌抗原和抗体(IgG和IgM)的微生物学实验室程序,以帮助诊断某些疾病并检查免疫状态。
目前有几种血清学检测方法,如酶联免疫吸附试验(elisa)、凝集试验、中和试验、Western blotting、直接和间接免疫荧光。
7.分子分析:各种分子技术包括脉冲场凝胶电泳(PFGE),随机扩增多态性脱氧核糖核酸(RAPD),质粒图谱分析,脱氧核糖核酸(DNA)测序,多重聚合酶链反应,以及更多的用于检测,分类和/或表征微生物。与传统方法相比,这些技术快速、省力、灵敏,对人类意义重大。
来源:
1.https://clinicalgate.com/microbiological-laboratory-techniques/#:~:text=Microbiologists%20use%20five%20basic%20procedures,platinum%20wire%20probe%20streaked%20across
2. https://www2.lbl.gov/ehs/pub3000/ch26/ch26_appx_d.html.
3.http://www.biocourseware.com/iphone/vml/bmlt/index.html
4. https://labmonk.com/blog/basic-techniques-of-microbiology/2/
5.https://www.aladdin-e.com/up_files/docs/Types%20of%20culture%20media%20used%20in%20microbiology.pdf
6. https://health.maryland.gov/laboratories/pages/-microbial-serology.aspx# ::::text = serology%20tests%20can%20be%20used ,indirect%20immunofluorence%2c%20der%20western%20western%20blotting。
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