纸色谱-原理,程序,应用
什么是纸色谱法?
纸色谱法的定义解释了这是一种廉价且功能强大的分析技术,需要一张纸或一条带作为固定相中的吸附剂,允许特定溶液通过固定相。
对于溶解性化学物质和脂类样品的分离(特别是),纸层析被发现是非常可靠的。这种分析工具使用的材料很少。
纸层析原理
纸色谱法是一种液相色谱法,其基本原理可以是分配色谱法或吸附色谱法。
在纸色谱法中,组分的分离分布在液相之间。在这里,液体的一个相是水,保持在滤纸的孔隙中,另一个相是流动相,随滤纸流动。当在滤纸孔隙之间的毛细管作用下移动时,混合物的分离是由于对水和流动相的亲和力不同而产生的。
虽然在大多数纸色谱应用中,原理是基于分配色谱,但有时,吸附色谱可以发生在固定相是纸的固体表面,流动相是液相的地方。
纸层析过程
- 选择理想的开发类型:根据溶剂、混合物、纸张等的复杂性等因素,选择开发类型。主要采用径向或上升式纸色谱法,因为它们在处理和执行时容易,最终导致在较短的时间内更快地获得色谱图。
- 滤纸的选择:根据孔的大小和试样的质量。
- 样品制备:这涉及到样品在理想溶剂中的溶解,该溶剂用于发展流动相。
- 纸张上的样品装载或斑点:在毛细管、微管的帮助下,样品在纸上被精确地点出。这有助于更快速、更容易地解释色谱图。
- 色谱图开发:这是通过将纸张浸入流动相进行的。由于纸张的毛细管作用,流动相穿过纸张上的样品。
- 纸张干燥及化合物检测:在空气干燥器的帮助下,色谱图一显影,纸张即被干燥。在色谱显影纸上,喷洒检测溶液并彻底干燥,以识别样品色谱斑点。
纸层析的类型
上升纸色谱法
根据名称,显影溶剂是向上运动的。这里,将足够数量的流动相注入显影室。样品和参考点在距离纸的底边几厘米处,用钩子或夹子悬挂在纸的顶部。
下行纸色谱法
在这里,溶剂沿着显影室顶部悬挂的纸的长度向下移动。流动相保持在上腔室的槽中。离纸顶几厘米处画的线上有斑点的纸被夹在纸顶。在洗脱前,将罐盖上并与流动相蒸汽平衡。
升降色谱法
这是一种混合类型的色谱,溶剂首先在折叠在杆子上的纸上向上移动,然后穿过杆子后向下移动。
水平或圆形纸色谱法
这允许通过液相的径向运动以同心圆区的形式分离样品组分。
二维色谱法
这有助于分解具有相似Rf值的物质。
式中,延迟因子(Rf)=溶质移动的距离/溶剂前沿移动的距离
纸层析的应用
在分析不同种类的化合物时,即:
- 氨基酸和有机酸
- 生物碱
- 多糖
- 蛋白质和多肽
- 天然和人造色素
- 无机阳离子
- 植物提取物
纸色谱在不同关键领域的应用
纸层析的用途并不局限于任何特定领域。一些必要的领域包括:
- 反应监测,反应的进展可以通过在不同的时间间隔内通过观察反应物来发展色谱图来估计。
- 分离和纯化-该技术可用于混合物组分的纯化和分离。在这里,纸上分离的成分被切割,溶解在合适的溶剂和使用光谱方法,他们的吸收特征在特定的波长。
- 的食物,分析合成饮料、冰淇淋、糖果等中的食用色素。仅允许使用食用色素,这就是为什么识别和量化至关重要的原因。
- 取证,为药物及其代谢物的鉴别和对照提供依据。纸色谱法在以毫克或微升为单位的样品分析中起着至关重要的作用。
- 药品,提供有关新药分子开发、反应完成和制造工艺进展的信息。该方法具有成本效益,因此可作为监测药物形式中活性成分的替代方法。纸色谱法也适用于药物制剂的颜色鉴定。
纸色谱技术在过去的几年里被广泛使用,并且仍然保持着它们在分离不同种类化合物方面的基础。
资料来源:
反应