分配色谱-原理，程序，应用和类型
分配色谱法是色谱法的一种，由理查德·劳伦斯·米林顿·辛格和阿彻·马丁在20世纪40年代引入。
分配色谱法定义
分配色谱的定义是，它是一种主要用于将混合物中的组分分离成两种液相的技术，即原始溶剂和柱中使用的溶剂涂层。
分配吸附色谱法
吸附层析法是另一种色谱法，溶质(气或液)分子直接吸附在固定相的表面。
分配和吸附色谱:相似之处
- 这两种色谱的作用原理是一样的
- 两者都用于分离混合物的化合物
- 两者都能分离气、液、固三个阶段的组分。
分配和吸附色谱:异同点
| 分配色谱法 | 吸附层析法 |
| 分离是基于分区的 | 分离的基础是吸附 |
| 固相萃取 | 液液萃取 |
| 固定相:液相 | 固定相:固体 |
分配色谱法原理
在分配色谱法中，组分与样品的分离是通过将组分在两相之间分配的过程进行的，两相均以液体形式存在。在此过程中，固定相上覆盖液体表面的不相溶固体表面即为流动相。
固定相使液体表面固定，最终变成固定相。就在移动相从固定相移开之后，这些组分被分离出来。这种分离是由于分配系数的不同。
色谱分配系数
当流动相在任何时间间隔停止流动时，溶质在两相之间获得平衡分布。在每一相中，浓度由色谱中的分配系数表示K＝C年代/ C米
在这里，C年代代表固定相中溶质的浓度
C米代表流动相中溶质的浓度
C的单位年代和C米可能是不同的。
在溶质均匀分布于两相的情况下，则K = 1。
分配色谱法程序
为了简单理解分配色谱法，我们在这里解释进行纸色谱法的过程。
设备要求:
- 色谱jar
- 毛细管
- 固定相
- 流动相-氯仿，甲醇，丙酮，或乙醇
步骤:
- 选择合适的开发类型基于溶剂,混合、纸张复杂性等发展类型是选择的。通常使用升纸色谱法，因为它是一种简单的技术，而且色谱图也很快获得。
- 选择一个固定相根据孔隙大小和分析物的质量，选择滤纸(固定相)。
- 〇准备样品样品的制备是通过将该组分溶解在适当的溶剂中，该溶剂在生产流动相的过程中被使用。
- 在纸上发现样本-将样品混合物应用于滤纸的适当位置。
- 展开色谱图在色谱瓶的帮助下，色谱展开是通过将纸张浸透到溶剂或流动相来确定的。通过毛细管作用，流动相被允许在测试样品上运行。
- 纸张干燥及化合物鉴定-色谱图展开后，滤纸在空气干燥器的帮助下干燥。具有不同分子带的纸张可以在UV柜中进行研究。也求出了Rf值。
分配色谱的类型
- 液-液色谱法:在这种分配色谱型中，使用一张吸附剂纸代替吸附柱。根据它们不同的迁移速度，对组分进行了划分。为了使色谱图可见，在分离后对它们进行染色。
- 气液色谱法:这也称为气液分配色谱法(GLPC)或气相色谱法。在气液分配色谱中，样品混合物的分离是用带管的惰性气体进行的。管的填充物是用被涂有非挥发性油的细小分离的惰性固体完成的。根据其在油中的溶解度和蒸汽压决定的速率，各组分发生了迁移。
分配色谱法的应用
- 分离和检测颜色混合物，包括颜料
- 分离和测定蛋白质、脂类、生物碱、糖苷和其他生物分子
- 分离和检测氨基酸和碳水化合物
- 检验药品的纯度
- 在DNA / RNA序列
- 测定食品和饮料中的污染物
- 分离极性和非极性化合物
来源:
反应