高效液相色谱柱的保养

一个高效液相色谱柱是最关键的组成部分HPLC.系统。结果的质量很大程度上取决于它的性能。虽然可以通过跟踪理论板的数量来监测HPLC柱条件,但建议您寻找其他迹象,如:

  • 峰形状的劣化
  • 保留时间的变化
  • 背压突然增加
  • 峰之间的分辨率差
  • 鬼峰的出现
高效液相色谱柱
高效液相色谱柱

通过遵守处理,使用和存储的建议指南,可以扩展HPLC列的使用寿命

处理

  • 避免掉落和其他机械冲击。冲击通常会导致渠道,这可以有助于尾尾
  • 在推荐的压力范围内操作高效液相色谱柱。压力过大会导致与机械冲击相同的问题
  • 仅使用兼容的螺母,套管和配件。不相容的配件会导致柱螺纹泄漏和损坏
  • 永远不会拧紧结束配件
  • 永远不要让仪表用作搅拌杆,用于混合移动阶段和缓冲液。

利用

  • 安装高效液相色谱柱,使流动方向与箭头方向一致
  • 使用0.45μm过滤器在使用之前,移动相应该是脱气和过滤。此外,在流动相储中使用在线滤波器。
  • 用流动相平衡柱,其与制造商储存溶剂(异丙醇)兼容。使用至少5-10卷平衡移动阶段
  • 在存储冲洗柱之前以去除任何残留的缓冲或离子配对剂。这对于防止干燥时的降解或缓冲盐沉积至关重要。
  • 三氧化硅柱的推荐pH范围为2.0 - 7.5。一些列允许从pH 1-11的范围内,但是对于安全操作和长柱的生活,您应该尽可能使用它在2.0-7.5 pH范围之间
  • 当更换流动阶段时,溶剂的选择应在极性方面是渐进的。避免变化或极端梯度。
  • 如果过度的背部压力开发,可以使用反向冲洗
  • 在注射之前通过0.45或0.2μm过滤器过滤所有样品
  • 注射器和分析柱之间的用户保护柱,以防止污染物和颗粒到达柱
  • 使用流动相溶解样品,如果不可能,则应使用另一种溶剂或极性相容的溶剂的混合物
  • 不要超过规定的温度限制,为了结果的一致性,使用柱式烤箱

贮存

  • HPLC柱应在环境温度条件下储存,从未在冰箱或烤箱中储存
  • 存储条件取决于使用之间的时间间隔:

可以使用几小时储存到过夜 - 与上一次分析相同的溶剂。

中等间隔储存(两天到周末)-用纯净水冲洗,防止微生物或霉菌生长。

长期储存 - 使用不应包含超过50%的水的洗脱液。

  • 使用使用后不建议使用肥皂或洗涤剂溶液。
  • 不能使用强酸或强碱,因为它们会造成完全不可逆的损害。
  • 储存时,端塞应紧密贴合,防止溶剂蒸发导致固定相干燥

我们希望您发现这些指南有助于获得高质量的结果,并增加您的专栏的使用寿命。请留下你的评论,分享你的任何经验。

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回应

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  1. 关于柱子的条件的情况是什么在生物分析物中使用
    因为这些列必须储存在4到8°c之间

    谢谢
    护士:对不起,我的英语不是很好

  2. “中间间隔储存(两天至周末) - 用纯净水冲洗以防止微生物或霉菌的生长”水如何水解微生物生长?特别是室温,相反,有机溶剂防止微生物生长。

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