柱色谱中理论板的概念

柱色谱中理论板的概念

作为一个色谱,您将有兴趣在性能效率方面从栏中获取最大返回。关于HPLC柱护理的有用提示已提前建议保留性能特征,并改善专栏的使用寿命。现在,问题出现了如何量化效率并决定您是否仍然可以使用该列以获得可靠的分离。答案在于在列的寿命上保持一条轨道。

色谱法的设定由两个阶段组成:流动相和固定相。先前的是流体,其中必须分离的混合物溶解。此外,含有流体的混合物通过分离发生的固定阶段。这是一列发挥作用的地方。

它包含静止阶段,并让移动设备通过它。这为我们带来了概念理论板材柱色谱。让我们了解它之前的重要性。

什么是理论板在HPLC?

色谱柱不包括任何可以不时测量的物理板,以率测量柱的性能效率。这只是一个理论概念图一个与使用的巨大分数蒸馏柱的相似性精炼粗石油。

这种蒸馏塔实际上包含分离器平板,有助于分离和分离不同的石油级分作为单独的物流。现在,让我们看看这个概念进入的地方Xistence。

HPLC理论板的历史

之前,分数蒸馏过程用于具有不同的长度和柱设计。因此,需要分离效率会计,从而带来了概念理论板材。这个的基础色谱板理论假设蒸馏程序在沿着二手柱的长度发生了各个阶段。

然而,这里要注意的点是分数蒸馏不属于色谱过程的类别。

为什么这些盘子很重要?

理论板在柱层析中,直接关系到其柱的效率。因此,它可以帮助提高分辨率,分辨率与的平方根成正比理论板材“所有其他变量保持常量”当所有其他变量保持不变。这意味着分辨率每次由四个升高的板数量升高两次。

从所有这些东西中,很明显理论板材暗示更好的分离质量,因为在静止和移动阶段之间可以获得更多的平衡。

您可以通过简单的楼梯示例理解这一点。随着楼梯的数量减少,每个台阶的长度都会增加。所以你需要更多地伸展你的腿来爬上每个楼梯。另一方面,较短的楼梯肯定会增加他们的数量,但他们将减少攀登他们中的每一个的努力。同样的事情理论板材。更多的板使整体分离过程更简单。

这些因素表明理论板材对于提高柱的效率并使色谱过程更加简单,这是重要的。

板载型 - 石油蒸馏塔
色谱中的理论板数量现在必须清楚它没有这样的盘子事实上在色谱柱中。您只需想象您的专栏分为许多部分或板块。如前所述,样品组件在每个板上花费有限时间,因为它移动柱长,这是在固定相和移动相之间在其浓度之间建立平衡所需的时间。

简单来说,可以说理论板代表每种吸附 - 解吸步骤所需的距离。作为一系列平衡的流动相插塞,从板上假设分析物的运动。换句话说越大的板块数量越大更高效的是列的分离能力。

柱长(L)上的板(n)的数量取决于板高度(h)

n = l / h

较小的板状高度意味着柱子中的大量板材,较高的是柱效率。H也被称为相当于理论板(HETP)的高度,并且HET的值越大,柱效率越大。

我们还可以注意到列长直接影响板数。它意味着柱越长,可以在其中结合更多的板。因此,您可以通过选择冗长的列来实现更好的效率。

计算数量(n)

n由规定的操作条件下注射标准的峰值计算

N = 16 \((\压裂{t_r} {W_b}) ^ 2 \)

其中tr是峰值的保留时间,并且Wb是峰宽度。在峰值宽度以半高或W1 / 2测量,那么该关系表示为

n = 5.54 \((\ frac {t_r} {w_1 _ / _ 2})^ 2 \)

在上述计算中,保持时间和宽度应该用相同的单位表示

现今的色谱软件提供Number N,无需手动计算,但基本假设是峰值形状应该是高斯。

解决了高斯形状的色谱峰
解决了高斯形状的色谱峰

理论板的数量取决于几种操作参数,例如流速,分析物特性,温度和样本量。重载柱迅速恶化其性能。

色谱中理论平板的高度

可用于测量柱效率的另一个因素是等于理论板(HETP)的高度。马丁和联邦队也提到了这款因素作为板块的厚度。

这是在板数的公式中使用的相同的高度。它通常以毫米计算。从楼梯示例中,我们可以看出每个板的高度决定了柱的数量和柱的效率。您还可以查看以下公式:

hetp = l / n,其中l是列的长度,n是板的数量。

因此,较短的我们保持高度,由于静止阶段的深度减小,可以获得更好的效率。

对板号的影响

以下是对中等影响的一些因素理论板材

  • 颗粒大小(很强的冲击力)
  • 连接互管的死卷(影响非常强烈)
  • 梯度概况(强烈影响)
  • 柱温(强烈冲击)
  • 柱长(强烈影响)
  • 固定阶段的组成(中等冲击)
  • 流动相的组成(中等冲击)
  • 颗粒的形状(中等冲击)
  • 颗粒形状的均匀性(中等冲击)

希望所有这些东西都制作了色谱板理论清楚给你。

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  1. 非常好的讲座......简单的语言和简单的概念转移方式..

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