吸光度和发光光谱测量之间的关键区别是什么?

这两种技术的基本光谱测量系统组件是相同的。然而，由于这两种技术之间的内在差异，在系统配置中必须进行一些定向和其他更改。

本文强调了这种差异的必要性。

射束方向

在测量吸光度时，必须认识到入射光束和透射光束被样品吸收后的运动方向是一致的。在发光的情况下，样品分子普遍地向各个方向发光。吸光度测量要求探测器对准与入射光束相同的方向。然而，在发光的情况下，探测器与入射光束的方向成直角排列。这种排列确保了发光光不受透射光组件的干扰。

光源

分子的荧光发射随光源强度的增加而增加。一个强大的光源有助于提高灵敏度。钨丝和氘灯不适合用于荧光应用，所需的源功率是通过使用汞蒸气或氙弧灯来实现的。发光分光计也使用激光激发源，它产生相干的单色光束，而不需要激发单色器。某些光敏样品需要脉冲氙气源来防止样品降解或光漂白

激发和发射单色仪

吸光度分光光度计只需要在光束路径中使用一个单色器来隔离所需的波长。探测器在被样品吸收后看到相同的波长。然而，在荧光测量的情况下，样品产生了一个发射波长范围，在发射单色器的帮助下，可以隔离波长以获得最佳的灵敏度。

样细胞

吸光度和光度测量都可以用比色管或通过细胞进行。玻璃电池可用于可见光区吸光度和发光度的测量，但紫外光和可见光区都应使用石英电池。吸光度测量需要精密加工的方形电池。然而，便宜的圆形细胞可以用于荧光测量而不牺牲灵敏度。

磷光测量

磷光的发射发生在样品辐照后一个显著的时间延迟之后。在77°k的液氮亚环境温度下获得更高的灵敏度。在如此低的温度下，溶剂应该作为透明的刚性玻璃存在。

样品在狭窄的石英管和液氮杜瓦瓶中采集。然而，一些无机材料在没有任何预处理的情况下表现出明显的磷光，可以在室温下进行研究

同时记录荧光和磷光是可能的，因为这类发射发生在不同的波长。通过使用激励和发射快门机制，可以消除这些测量之间的共同干扰。当入射光被切断时，荧光停止，磷光继续。百叶窗的机械运动可以帮助区分这两种发射。

随后的文章将涵盖荧光测量已经发现主要应用的关键领域。