如何克服紫外线 - 可见光镜研究的干扰?

第二衍生物清楚地定义了肩峰的波长
第二衍生物清楚地定义了肩峰的波长
第二衍生物清楚地定义了肩峰的波长

理想地,含有单个分析物的溶液的吸光度光谱应该是最大吸光度波长的单个吸收带。然而,在实际样本中,光谱受到其他干扰物种的存在影响。通过采用文章中涵盖的不同方法可以容易地消除这种干扰。

UV-可见光谱的干扰是由几种因素产生的,这可以是物理或化学物质。化学干扰是由存在于任何单一或一组化合物的存在,该化合物在初级吸收分子的近距离吸收。另一方面,物理干扰通常来自样品中的悬浮固体杂质,这可能导致散射。

身体干扰

光的散射是由吸收溶液中悬浮杂质的存在引起的。导致背景吸光度降低了利益分析物的吸光度。在吸光度测量之前对样品的过滤或离心似乎是显而易见的解决方案,但是当仅有μl尺寸样本时,这不是一种实用的方法。通过降低样品和检测器之间的间隙,可以减少由于散射引起的吸光度损失。

化学干扰

化学干扰可能是由于在光吸收溶液中的单个或一组吸收实体存在而导致的。

isoabsorbance测量

在具有已知吸光度特性存在干扰化合物的情况下,通过选择干扰化合物在分析波长在分析波长下表现出一些吸光度的波长,可以消除其对主分析物的干扰。在从吸光度下减去在该波长处的吸光度下减去吸光度分析波长残留吸光度是分析物的正确吸光度。如果存在单个干涉,并且如果其最大吸光度波长远离分析物的吸收波长,则该方法是实际的。

多组分干扰

当存在多于一个干扰时,多组分分析适用,并且具有主要分析物的光谱具有相当大的光谱重叠。从测量的吸光度中减去纯干扰的吸光度,从而达到感兴趣的分析物的真正吸光度,

三点纠正

在该方法中,选择两个波长靠近分析波长,而是在其两侧选择。可以使用线性插值准确地估计背景的干扰。该方法特别适用于由复杂样品矩阵产生的非线性背景吸收。

衍生光谱法

到目前为止,最方便的背景和噪声校正方法是衍生光谱。第一衍生物的拐点对应于最大吸光度的波长,并且第二衍生物看起来作为负形峰的尖端。这有助于区分非常紧密间隔或重叠的吸光度峰值。第一种衍生物进一步消除基线移位,如果有的话,并且这有助于提高定量分析的准确性。除了基线移位的外,衍生光谱还有助于克服散射从其他未识别的干扰化合物的影响。

相关文章

回应

您的电子邮件地址不会被公开。必需的地方已做标记*

small_c_popup.png.

不要被遗漏!

超过20,000家科学家阅读我们的每周通讯!

Baidu