什么是防护柱,它们在HPLC分析中提供了什么好处?
有效的操作HPLC系统依赖于化学杂质或固体悬浮液的流动相的自由度和样品。处理和使用HPLC流动阶段的注意事项讨论在准备和使用流动阶段时应采用的措施。样品过滤的重要性讨论清洁样品注射的好处。
HPLC列是需要的HPLC系统的关键组成部分仔细处理和保护。保持逐柱经常保持昂贵,因此您的目标应该是最大化柱的使用寿命,以便每次获得所需的准确性和结果的一致性。
的色谱行为HPLC.柱子开始衰减,由于杂质和悬浮液的逐渐积累。在流动相或样品中存在大于2μm的颗粒或样品开始沉积在柱的入口玻璃料上,从而扰乱流动的均匀性。较小的颗粒导致背压增加,因此它们开始阻挡固定阶段中的流动路径。
污染物的性质
- 高度保留的化合物如反相分离的脂肪酸
- 不可逆地保留的化合物,如在样品萃取时未完全除去的残留蛋白质。生物液体中蛋白质的去蛋白质化在强烈建议HPLC分析之前。
- 颗粒状杂质可以由未过滤的样品产生,通过泵或喷射器中的系统部件的磨损释放的颗粒。
- 由于柱内剩余缓冲液干燥而导致结晶沉积。使用后用高效液相色谱级的水或缓冲溶液清洗色谱柱,防止这种盐沉积的形成。
什么是警戒纵队?
保护柱是安装在喷射器和分析柱之间的保护柱或盒子。它用于除去杂质和悬浮固体到达分析柱。通常,它的长度约为2cm,内径为4.6mm。保护柱用大约40μm尺寸的Pelicullar颗粒包装,以提供可忽略的压降。
保护柱的理想特点
- 保护柱应优选与分析柱相同的包装,以消除分离并发症
- 保护柱的内部ID应与分析柱相当,以最小化后压。更短的防护柱长度是优选的,但它应该足够长以防止强烈保留的化合物到达主柱
- 喷射器表面的熔块应该是可拆卸的,以便清除约2毫米的材料,并用新鲜的材料填充
- 与可再充气的保护柱相比,一次性墨盒式保护柱使用方便、经济。
保护柱需要定期更换,但通过观察色谱行为的变化,如背压增加、峰展宽和峰保留时间的变化,需要进行中间变化。然而,变化的频率可以根据样品的化学成分、高度保留或不可逆保留的成分的存在、注射量或注射次数来决定。
请分享您对使用保护栏目的经验,并留下您的评论。
对于天然气分析仪,是否需要使用这种柱(GUARD柱)?
谢谢很多兄弟。
嗨哈桑,
在本文中,我们讨论了HPLC保护柱。对于GC分析仪或天然气分析仪从来没有遇到过使用保护柱。保护柱的目的是防止固体杂质或化学杂质到达主柱。在高效液相色谱分析中,如果样品或流动相过滤不充分,固体颗粒就会进入主柱,但如果采用气相色谱技术,则很少遇到这种问题。采用预防技术,可有效克服因浓度过高或其他杂质引起的塔体超载问题。
非常感谢你。这篇文章给了我很多有用的信息。我是中国人