如何在HPLC分析前去蛋白生物液?

脱蛋白作用的作用范围不断扩大高效液相色谱法生物液体分析。HPLC分析前样品过滤。样品过滤在液相色谱分析中的重要性强烈建议延长柱寿命，降低维护成本，从而有助于提高实验室吞吐量。

除过滤外，对血浆、血清、尿液和脑脊液等生物液体进行脱蛋白分析，以确定抗生素、残留农药和精神药物的水平也是必要的。蛋白质需要沉淀并从样品中去除，否则这些会导致柱性能的恶化

除蛋白技术

变性- 加热变性大多数蛋白质和加热变性颗粒后离心并除去。

化学沉淀 -比加热更有效，因为对温度敏感的化合物会在加热过程中恶化。用三氯乙酸酸化，离心，氢氧化钠中和，去除99%的蛋白质。也可以使用全氯乙酸。这两种酸都有一些缺点。三氯乙酸在230 nm以下具有较强的吸收能力，而全氯乙酸则在溶液中留下盐类，可与有机溶剂沉淀或对紫外检测器的基线噪声有影响

乙腈治疗- 乙腈是常见的溶剂透明，低于190nm。血浆样品和乙腈的混合和离心将导致约95％的蛋白质沉淀。诸如白化素的非极性蛋白质保留在液相中。如果用于去除蛋白质的余量5％，则可以直接注入上清液。在长期使用中，需要更换或倒置保护柱并洗掉以防止蛋白质进入主柱。

在线除蛋白

一般情况下，在加入酸或有机溶剂后，进行脱机脱蛋白，然后离心即可。然而，为了节省时间，自动化在线脱蛋白是可取的。一些仪器供应商提供专门的配件，主要包括一个预处理柱:填充亲水聚合物涂层。大分子蛋白质被保留，而分析物被引到主柱。

我们已经看到，脱蛋白质扩大了生物流体的高效液相色谱分离的应用，这些流体是复杂的基质，如果不使用该技术，对这些流体的高效液相色谱估计将是困难的，甚至是不可能的。

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