什么是卫兵栏目以及他们在HPLC分析中提供的好处?
高效运行高效液相色谱系统取决于流动相的自由和样品从化学杂质或固体悬浮液。高效液相色谱流动相的处理和使用注意事项讨论了流动相制备和使用过程中应采取的措施。样品过滤的重要性讨论干净样品注射的好处。
高效液相色谱柱是高效液相色谱系统的关键组成部分小心处理和保护。频繁更换色谱柱是非常昂贵的,所以您的目标应该是最大化色谱柱的使用寿命,以便每次您都能得到所需的准确性和一致性结果。
的色谱行为高效液相色谱法由于杂质和悬浮物的逐渐积累,柱在使用期间开始下降。流动相或样品中大于2μm的颗粒开始沉积在色谱柱的入口熔块上,从而干扰了流动的均匀性。更小的颗粒导致背压增加,因此它们开始阻塞固定相的流动路径。
污染物的性质
- 反相分离中高度保留的化合物,如脂肪酸
- 不可逆保留的化合物,如残留的蛋白质,在样品提取时没有被完全去除。生物液中蛋白质的脱淡化化强烈建议进行HPLC分析。
- 颗粒杂质可能是由于样品未过滤,系统部件(如泵或喷油器中的密封件)磨损而释放的颗粒。
- 用柱内的残留缓冲液干燥产生的结晶沉积物。使用或缓冲溶液后用HPLC级水洗涤柱防止这种盐沉积物形成。
什么是守卫栏?
保护柱是安装在喷油器和分析柱之间的保护柱或药筒。它的作用是去除进入分析柱的杂质和悬浮固体。通常它的长度约为2厘米,内径为4.6毫米。保护柱由大约40 μm大小的胶束颗粒填充,可以提供微不足道的压降。
保护柱的理想特性
- 保护柱最好与分析柱的填料相同,以消除分离并发症
- 保护柱的内径应与分析柱相似,以减少背压。较短的保护柱长度是可取的,但它应该足够长,以防止强烈保留的化合物到达主柱
- 面向喷射器的玻璃料应通过去除约2毫米材料并用新鲜材料填充来除去清洁
- 与可再填充的防护柱相比,使用一次性墨盒式防护柱是方便且经济的使用。
需要定期改变防护栏,但通过观察色谱行为的变化,如背压,峰值扩大的增加,峰值的变化,中间变化是必要的。然而,可以基于样品的化学成分,存在高度保留或不可逆的保留组分,注射体积或注射次数来确定变化的频率。
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对于天然气分析仪,是否需要使用这种柱(保护柱)。
谢谢兄弟。
嗨,哈桑,
在本文中,我们讨论了HPLC保护栏。对于GC分析仪或天然气分析仪从未遇到过防护栏。保护柱的目的是防止固体杂质或化学杂质到达主柱。在HPLC分析中,如果样品或流动相对于充分滤波但是在情况下基于GC技术的情况下,可以找到它们的方式。采用预发泄技术。
非常感谢。这篇文章给了我很多有用的信息。我是中国人