基于溶质-固定相相互作用分类的高效液相色谱的一般应用

高效液相色谱法根据流动相和固定相中溶质的相互作用，将其分为四类。本文简要地讨论了高效液相色谱技术的分类:正相色谱法、反相色谱法、离子交换色谱法和阻容色谱法关于高效液相色谱的免费课程。本文将介绍这些类中的一些主要应用程序类型。

正相色谱法

固定相是硅基的，并被极性基团所覆盖。流动相在本质上是非极性的。分离分子的洗脱顺序依次为非极性、弱极性和极性分子。

• 正相色谱法分离具有不同官能团的化合物的效果优于反相色谱法，反相色谱法保留了大部分极性基团。留存率下降的顺序为:

羧酸酰胺类醇类酮类醛类醚类芳香族烯烃7饱和烃

• 同分异构体的分离

亲水性化合物保留在固定极性相上并从疏水性化合物中分离出来。

反相色谱法

大多数应用是在制药，生命科学，食品工业等是覆盖在反相分离。惰性的硅基固定相被非极性分子所覆盖。最常用的填料是共价结合的十八烷基硅(ODS - c18)，其次是辛基(C8)和己基(C6)基团。流动相比固定相极性更大。溶质分子按疏水性增加或极性减少的顺序被洗脱。

离子交换色谱法

离子交换色谱由二氧化硅支撑，其上的带电阴离子或阳离子基团被固定，以保留相对带电的分子从流动相。季铵盐为强阴离子交换剂，胺为弱阴离子交换剂，磺酸为强阴离子交换剂，羧酸为弱阳离子交换剂。

该技术主要用于从蛋白质、药物等混合物中分离出纯化合物，从血液和尿液等生物液体中分离出代谢产物，从组织中提取酶，以及分离有机酸和碱性化合物混合物。

尺寸排阻色谱法

这类色谱分离在某种意义上是独特的，因为分离不基于洗脱化合物和固定相之间的化学相互作用。相反，它是基于分子大小差异的洗脱分子和他们的能力渗透孔的固定相。大分子首先被洗脱，然后是小分子，小分子被困在固定相的孔隙中，然后被洗脱。

凝胶过滤色谱用于水溶性聚合物的分离。凝胶渗透色谱法更常用于分析有机可溶性聚合物的分子量分布。

本文简要介绍了不同高效液相色谱技术的应用领域。该领域正在不断扩大，在制药、生物技术、食品、法医等领域可以发现更多的应用。柱技术和自动化的进步对高效液相色谱分析的范围作出了重大贡献，应用的数量正在以惊人的速度增长。

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