HPLC溶剂选择中的批判考虑因素

流动相制备的溶剂选择需要仔细审查其性质
流动相制备的溶剂选择需要仔细审查其性质
流动相制备的溶剂选择需要仔细审查其性质

选择溶剂用作流动阶段HPLC.分析是方法开发的关键组成部分。不可能根据分析要求确定将满足所有应用的通用溶剂,并且通常是溶剂的组合。选择合适的溶剂是基于它们的物理性质和叠加能力,并柱固定相。

本文讨论了一些重要的考虑因素,在决定溶剂作为流动阶段的适用性方面发挥着重要作用。

成本

成本是,随着HPLC需要优异的纯度等级溶剂,且很常见于大型实验室中的时钟运行的数十种HPLC系统。这意味着在批量数量中消耗高级溶剂,因此成本考虑起到重要作用。

溶解度

样品应完全溶于流动阶段。最轻微的不透明度将导致相分离或悬浮液,这将有助于操作问题。

吸光度

通常,HPLC中使用的检测器基于样品竞争分物的光吸光度。选定波长范围内的流动相分子的固有吸光度不应干扰样品的吸光度。理想情况下,流动相溶剂应在感兴趣的波长下没有吸光度。

波动

流动相溶剂应具有低挥发性,特别是与光散射探测器一起使用。高挥发性溶剂可导致组成变化移动阶段成分过度使用和储存。这可能导致色谱再现性差。

粘度

所选择的溶剂应具有低粘度,使得流过柱不会导致高压压力的发展。

惯性

所选的溶剂应对样品组分、柱填料和柱材料无惰性。与这些组分的任何反应都可能导致沉淀物、气体或其他反应产物的形成,从而破坏系统的性能。溶剂在与样品接触时不应形成分离相。换句话说,溶剂应该是完全可混的。

水也是反相流动相组分的重要组成部分,无论是与其它溶剂结合还是作为缓冲介质。水净化系统在市场上可以买到。这种系统产生的水应该尽早使用,这样它的质量在储存期间不会下降。

HPLC技术对移动相的组成的变化高度敏感,从而达到检测器,因此必须通过0.45μm过滤器过滤溶剂以除去任何固体悬浮液。脱气也是去除任何可能导致流动限制或杂散峰的任何溶解空气的必要要求。

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