什么是理想的高效液相色谱流动相?

物质的量浓度计算器
化学实验室(浅景深)
高效液相色谱流动相


移动阶段已被正确地称为生命线高效液相色谱法系统。它起着将样品通过分离柱输送到检测器对分离出的组分进行鉴别的重要作用。

流动相很少是单一溶剂。它由水与有机溶剂、水缓冲液与极性溶剂或有机溶剂按所需比例的混合物组合而成。常用的两种操作模式是:

权力平等主义的模式-在等临界模式下,流动相的组成在整个分析过程中保持不变。E,溶剂在混合物中的比例是预先确定的,在分析过程中保持不变

梯度洗脱,通过软件在预定模式下的分析运行来改变组成,在运行结束时,溶剂的比例与初始比例不同。

使用不同溶剂混合物的目的是为了在尽可能短的时间内达到所需的分离组分峰的分辨率,从而达到所需的流动相极性,使样品完全可混溶,并控制样品组分与固定相的相互作用。

为了达到所需的目标,流动阶段应具有下列基本特征:

  • 样品应在流动相中完全溶解。任何不溶性都会导致流动受限。进样前一定要检查样品在流动相中的溶解度。
  • 流动相组件应是无害和无毒的。它们不应对操作者的健康构成任何危害。
  • 流动相对样品组分和固定相应该是惰性的。任何反应都可能导致不溶性悬浮液的形成,从而导致柱堵塞。
  • 流动相在通过检测器时不应给出它自己的响应。换句话说,检测器信号应该只反映样品组分的响应。然而,这并不适用于体性能检测器,如折射率检测器,它响应包含洗脱化合物的流动相的折射率的整体变化。
  • 流动相应该是负担得起的,使用的溶剂比例应该使分析在经济上可行。

重要的是要混合指定纯度的溶剂和来自同一来源,以得到一致性的结果,也采用相同的离线混合技术为避免因热误差引起的混合误差。在使用缓冲液的情况下,在与有机相组成最终体积之前,总是调整水相的pH值。

高效液相色谱技术在许多领域都具有广阔的应用前景。操作条件的控制,包括流动相的一致性,将确保结果的重复性。

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