偏离啤酒-朗伯光谱吸收原理

光谱吸光度测量是基于著名的比尔·朗伯定律，该定律指出，在选定的波长下，吸收物种的吸光度与样品电池的浓度和路径长度成正比。

对比尔·朗伯定律的偏离主要分为三类:

• 法律的限制
• 化学变化引起的偏差
• 杂散辐射

比尔-朗伯定律限制

比尔·朗伯定律适用于浓度通常低于10mM的稀溶液。在较高的浓度下，物理相互作用，如溶质-溶剂，溶质-溶质和氢键可以发挥作用并影响吸收测量。因此，浓度-吸光度图开始显示出与线性行为的偏差。

化学变化

溶质的吸收行为的变化，由于化学相互作用，如缔合和离解，以及增加浓度或改变溶剂的pH值。由于pH值变化时的电子跃迁，吸收物质的颜色会发生明显的变化。分子中发色团的取代可导致吸收最大波长的偏移。

杂散辐射

杂散辐射是到达探测器的辐射，其波长在单色器所选择的范围之外。它是由系统的光学元件表面对光线的反射和散射产生的。理想情况下，单色器应该从多色光束产生单一波长，但这种情况很少发生，相反，一个波段的波长被隔离。被分析物的吸收也可以发生在杂散的辐射波长，并导致偏离比尔朗伯定律。

随后的一篇文章将描述仪器参数如何影响光谱观测。