UHPLC比普通HPLC有什么好处?
用户期待的高效液相色谱最理想的特性是:
- 最高分辨率
- 可实现的最大灵敏度
- 分析速度最快
随着超高效液相色谱(UHPLC)的引入,这些都成为了现实。柱效随着固定相粒径的减小而增大。常规的分析分离采用3-5μm粒径范围内的颗粒。在2003年打破了亚2μm的屏障,在2005年Pittcon实验中,展示了亚2μm颗粒填充的色谱柱。这一发展预示着UHPLC时代的到来。
首先让我们了解UHPLC和正常的本质区别高效液相色谱法.
列维度
与分析柱(4.6 mm ID X 250 mm长度)相比,UHPLC柱通常更短、更窄(2.1 mm ID X 50 mm长度)
操作压力
与常规的高效液相色谱(5000 - 6000 psi)分析范围相比,UHPLC系统能够处理高压(15,000 - 18,000 psi)。泵能够承受这样的条件下,磨损最小的组件。
流率
与常规的高效液相色谱(1 - 2 ml / min)相比,UHPLC分离需要更低的流速(250µL / min - 750µL / min)。这样的低流量需要泵具有精确的计量和梯度再现性。
检测
在UHPLC色谱柱上分离经常产生狭窄的峰(几秒钟或更少)。传统的探测器由于数据点较少,响应速度较慢,产生的峰值被压缩。UHPLC检测需要高速响应(> 100Hz)
分析时间
UHPLC在节省时间和增加实验室吞吐量方面具有很大的优势。使用常规粒度的颗粒进行分析分离平均需要10 - 30分钟或更长时间。相比之下,超高效液相色谱法的分离时间大多在10分钟以内,有的甚至在2分钟以内
提高分辨率
由于以上所述的优点,UHPLC获得的峰的分辨率更高,而且与常规分析分离相比,其时间也更短。
减少运营成本
高效液相色谱是一种昂贵的技术,需要使用高纯度的溶剂。UHPLC可以节省操作成本,因为与分析用的高效液相色谱相比,色谱运行时间短,流速低。
UHPLC已在新药开发、药品质量控制、生命科学和环境分析等领域得到广泛应用。柱状充填技术的进步,例如:核心壳技术与LC-MS -MS的结合必将使UHPLC更加流行,并进一步扩大其应用范围。
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亲爱的先生,
我实验室里有超高效液相色谱。我可以在这台机器上使用1-2 ml/min流速的普通高效液相色谱柱吗?
谢谢你!
的确是的。UHPLC系统设计用于在正常和高压下工作。