HPLC中常见的峰形畸变及其预防
一个色谱学家总是期待得到完美的形状的峰,每一个分析,但实际上,由于许多原因,峰失真。扭曲是令人沮丧的,但如果采取适当的纠正措施,峰值形状扭曲可以避免。
理想的高峰
平顶高峰
当检测器对样品过载时,出现一个平顶峰值响应。在这种情况下,探测器的灵敏度要高得多,它会饱和,从而产生一个宽阔的平顶峰。一种选择是衰减信号响应(不是实际的解决方案),因为对其他峰值的检测也会受到影响。一个更可行的选择是降低样品的浓度或注射的体积。
峰尾矿
峰尾是由于表面硅醇基团电离为- Si-O -而产生的一种常见的畸变,提供了阳离子交换位点。该溶液使用高纯级二氧化硅载体,并选择推荐的pH值范围2-8。
缓冲剂控制添加剂的使用也限制了硅烷表面硅醇基团的电离。添加剂,如三氟乙酸(TFA)的离子配对剂有助于抑制电离。缓冲添加剂的浓度范围在10 - 25mm是足够的大多数应用。
可以通过过滤流动相溶剂、使用进口过滤器和在泵密封开始磨损和释放垃圾颗粒之前更换密封来防止熔块堵塞或形成空隙。
低纯度二氧化硅通常含有促进硅烷基电离的金属杂质。使用高纯度的二氧化硅固定相可以与固定相中的金属离子进行螯合,有利于尾矿的回收。
面对高峰
与峰尾相比,峰前现象较少
一般来说,由于柱体内部的窜流而使峰向前移动。最好更换色谱柱或在推荐的pH范围内操作。
柱过载也会导致峰值提前。使用稀释样品或减少进样量。
流动相与样品的不相容常常导致峰前现象。将样品溶解于流动相或其它相容溶剂中
峰肩和分峰
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肩峰和分峰通常是由于两种紧密未解的化合物的存在而产生的。
减少样本量或使用稀释的溶液往往解决分裂
峰的劈裂也是由于熔块堵塞引起的。逆流注入20 - 30ml流动相可以解决峰裂问题。
更换堵塞的熔块或保护柱
当由于两种紧密洗脱化合物的存在而导致分裂时,在注射前要进行样品清洗
正如你在上面看到的,峰形扭曲的许多原因是常见的,如移动相的pH控制,颗粒污染造成的堵塞,堵塞的熔块和柱过载。可以在必要时通过采取纠正步骤和其他建议步骤来改善扭曲的形状。
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嗨,迪帕克
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现在在孟买经营我自己的生意作为科学仪器销售翻新的HPLC GC HS AAS
我已经将TSP FL 3000卖给了Nasik的一个客户,用于HPLC农业化学分析
当我们注射葡萄提取物的Dervistised样品时,我们有很多噪音和驼峰
问题是什么
探测器连接到水双星系统,授权II通过SAT在Bpox
我们要去找Nosie了
嗨,拉梅什,
在衍生化过程中,出现了一些杂质的引入。由于不明杂质是产生噪声的主要原因,尝试使用纯度更高的衍生化试剂。同时要注意将流动相彻底除气,因为微小的气泡也会产生随机噪声。
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